Endogenous expression of the glycine transporter 2 in C6 glioma cells: a preliminary study

Abstract

C6 glioma cells have been proposed as a cell model system to study regulation of endoge-nously-expressed glycine transporter 1 (GlyT1). However, there are no reports demonstrating expression of glycine transporter 2 (GlyT2) in this cell line. To explore this possibility, im-munoprecipitation, western blotting, confocal microscopy, as well as glycine uptake assays using selective inhibitors to GlyT1 or GlyT2 were employed. Glycine uptake assays using a selective inhibitor against GlyT2 provided evidence that this transporter could also be ex-pressed in this cell line. Immunoprecipitation, immunoblotting, and confocal microscopic analysis also showed presence of both GlyT1 and GlyT2 in this cell line. Taken together, results provide evidence that in addition to GlyT1, GlyT2 is also endogenously expressed in C6 glioma cells. Results presented here will help researchers to carefully evaluate use of this cell line in studies involving GlyT1

Se ha propuesto el uso de las células C6 de glioma como un modelo celular para el estudio de la regulación del transportador de glicina 1 (GlyT1, por sus siglas en inglés) expresado de forma endógena. Sin embargo, no existen reportes que demuestren la expresión del transportador de glicina 2 (GlyT2, por sus siglas en inglés) en esta línea celular. Para explorar esta posi-bilidad, se utilizaron diversas técnicas experimentales, como inmunoprecipitación, Western blot, microscopía confocal y ensayos de transporte de glicina, empleando inhibidores selecti-vos. Los ensayos de transporte de glicina utilizando inhibidores selectivos proporcionaron evidencia de la expresión de GlyT2 en esta línea celular. Los análisis realizados utilizando inmunoblots y microscopía confocal también demostraron la presencia de GlyT1 y GlyT2. Nuestros resultados proporcionan evidencia de que, además de GlyT1, las células C6 de glioma también expresan el GlyT2, indicando que se debe evaluar cuidadosamente el uso de esta línea celular para el estudio de GlyT1