Estudio de la generación de estereocilios en precursores de las células ciliadas

Abstract

La sordera neurosensorial es la pérdida de la audición por daño en el oído interno causada por el uso de algunos fármacos, exposición a sonidos muy altos o debido a mutaciones genéticas. Particularmente, el daño de las células ciliadas puede ser permanente ya que estas células no se regeneran. Por tal motivo, el estudio de su desarrollo y de la formación de sus estereocilios es importante para plantear terapias de reemplazo celular. La investigación sobre células troncales ha dado la oportunidad de desarrollar progenitores de células auditivas. La línea celular iMOP (immortalized multipotent otic progenitor cells), se obtuvo a partir de progenitores cocleares murinos, tiene la capacidad de autorrenovarse y formar esferas que expresan genes marcadores del oído interno en desarrollo y del sistema nervioso. Los resultados muestran que las células iMOP pudieron manejar diferentes concentraciones de calcio, pero además, mostraron una variación de tamaño al aplicar ATP a diferentes concentraciones. También se observaron variaciones de la intensidad de fluorescencia dependientes de la concentración de ATP, en presencia del indicador de calcio Fluo-4 y ausencia de calcio extracelular, en otoesferas de células iMOP. Este comportamiento indica la existencia de receptores purinérgicos P2 en dichos progenitores óticos multipotentes. De acuerdo con los patrones de respuesta, se encontraron tres tipos de comportamiento principales que a su vez se clasificaron en respuestas positivas o negativas. Además, se observó una disminución del calcio intracelular en presencia de suramina, antagonista del purinoreceptor P2, confirmando por primera vez la presencia de receptores de ATP en la línea celular iMOP También se realizó un análisis espectral en el que los datos de señalización de calcio del dominio del tiempo se transformaron al dominio de frecuencia. Este análisis sugiere la existencia de una relación entre la concentración de ATP y la respuesta en un rango de frecuencia.