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http://repositorio.ugto.mx/handle/20.500.12059/10449
Title: | Comparación de proteínas fúngicas secretadas por el aislado fungico a7 bajo diferentes condiciones de cultivo. |
Authors: | Juan Magaña Martínez |
Abstract: | En este trabajo, se presenta la comparación de la actividad de dos glucosidasas secretadas por un aislado fúngico denominado A7, el cual pertenece a un consorcio microbiano que degrada polímeros plásticos en suspensión. Se caracterizaron morfológicamente las colonias del aislado fúngico crecido en los medios de cultivo agar dextrosa papa (PDA), agar dextrosa-extracto de levadura-peptona (YPD) y agar medio mínimo de Mathur sales (MMM), los cuales se incubaron durante 7 días a 28 °C. La caracterización microscópica del hongo se realizó en microcultivos que se tiñeron con azul de lactofenol. Para determinar la capacidad del hongo para aprovechar como fuente de carbono diferentes polímeros naturales o sintéticos, el asilado se cultivó a 28 °C en MMM adicionado con diferentes polímeros naturales o sintéticos (0.1% p/v), como fuente de carbono y, utilizando un cultivo control adicionado con glucosa (GLC). Después de 2 semanas de incubación, se observó el crecimiento fúngico, mayoritariamente en el cultivo control y, en orden decreciente a los realizados con celofán dulce (CD), carboximetilcelulosa (CMC), celulosa cristalina (CEL), tereftalato de polietileno (PET), poliestireno (PS), polietileno de alta densidad (PE) o celofán amargo (CA). Se analizó la actividad enzimática y la proteína secretadas en cultivos realizados en condiciones estáticas ode agitación (120 rpm), durante 21 días a 28 ºC, adicionando al MMM los diferentes polímerosnaturales (0.1% p/v). Cada semana se recuperó un cultivo representativo y se determinó, en el sobrenadante libre de células, la actividad de glucosidasa y celobiosidasa utilizando sustratos unidos a 4-metilumbelliferona (4MU). La proteína secretada se determinó por la técnica de Lowry y el patrón de proteínas en geles SDS-PAGE al 10%. Nuestros resultados muestran que el asilado fúngico tuvo un mayor crecimiento radial en YPD>PDA>MMM, con morfología colonial dependiente del medio de cultivo empleado. Microscópicamente, se observó un micelio septado, con conidióforos y fiálides conteniendo conidios redondos; sugiriendo un hongo del género Penicillium. La proteína secretada fue mayor en condiciones de cultivo estático y el perfil electroforético mostró la secreción diferencial de proteínas, con pesos moleculares de 108 - 18 kDa, dependiendo del sustrato utilizado como fuente de carbono, observándose que el sustrato que indujo la mayor actividad de β-glucosidasa y celobiosidasa fue la CMC. Con base en estos resultados, se ha iniciado la caracterización molecular del aislado A7 y la purificación de la actividad enzimática secretada durante su crecimiento en CMC y en un futuro determinar su posible aplicación biotecnológica. |
Issue Date: | Oct-2023 |
Publisher: | Universidad de Guanajuato |
License: | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0 |
URI: | http://repositorio.ugto.mx/handle/20.500.12059/10449 |
Language: | spa |
Appears in Collections: | Revista Naturaleza y Tecnología |
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COMPARACIÓN DE PROTEÍNAS FÚNGICAS SECRETADAS POR EL AISLADO FUNGICO A7 BAJO DIFERENTES CONDICIONES DE CULTIVO.pdf | 1.71 MB | Adobe PDF | View/Open |
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