Purificación de péptidos antimicrobianos a partir de trampas extracelulares de neutrófilos humanos

Abstract

La inmunidad innata es la primera línea de defensa ante la llegada de un patógeno, es inmediata y de baja especificidad. Intervienen células como, neutrófilos y macrófagos; que participan mediante la secreción de moléculas como citocinas, que modulan la respuesta inmune,y quimiocinas que atraen más células al sitio de la infección. Las células epiteliales, los neutrófilos y macrófagos secretan péptidos antimicrobianos que tienen un carácter anfipático y son de tamaño no mayor a 100 aminoácidos. En este estudio,se aislaron neutrófilosmediante un gradiente de densidad, a partir de sangre periférica de donadores voluntarios sanos.Los neutrófilos seestimularoncon acetato de forbolmiristato (PMA),para inducir la formación de trampasextracelulares(NETs). Éstas sonfibras de DNA descondensado asociado a proteínas nucleares como histonas y a péptidos antimicrobianos derivados de los gránulos de los neutrófilos.El objetivo de este estudio fue separarlos péptidos catiónicos de las NETs para su posterior análisis. Para ello se empleó una columna de intercambio iónico, y la fracción de péptidos se analizó por electroforesis. Se estandarizaron las condiciones para aislar los péptidos antimicrobianos presentes en trampas extracelulares de neutrófilos para posteriormente identificarlos empleando anticuerpos específicos