Cultivo de anteras e inducción de callo haploide en germoplasma bc3 de girasol (Helianthus annuus L.)

Abstract

El girasol es la cuarta oleaginosa más importante a nivel mundial debido a su producción anual y al alto contenido de aceite en la semilla. Por otro lado, los haploides son una alternativa para obtener líneas endogámicas en corto tiempo. El objetivo de esta investigación fue desarrollar un protocolo para obtener callo haploide cultivando anteras in vitro en germoplasma segregante, empleando el medio Murashige & Skoog (MS). Se realizaron dos bioensayos: el primero consistió de 25 tratamientos con combinación de cinco dosis de ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) y benciladenina (BA) de 0 μM a 54 μM; el segundo consistió de cinco tratamientos, partiendo de 1.36 μM de 2,4-D y 1.33 μM de BA, incrementando en 1.36 μM y 1.33 μM de 2,4-D y BA, respectivamente, hasta la concentración de 6.80 μM de 2,4-D y 6.65 μM de BA. El callo obtenido se fijó con Farmer y fue observado al microscopio. En el bioensayo I, la inducción de callo apareció en 25 días en dosis bajas, con mayor peso fresco; con dosis mayores, la inducción se presentó en 40 días (r = -0.95). En el bioensayo II, la inducción apareció en 23 días con la dosis 6.80 μM de 2,4-D y 6.65 μM de BA y mayor peso fresco de callo. No se obtuvieron brotes en callos trasplantados. Se observaron granos de polen, callo haploide y diploide y células con genoma haploide.